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     Rubrique : Microscopes > Microscopie à fluorescence appliquée       Rubrique, Rubrique:

L'ApoTome : système réalisant des coupes optiques en microscopie à fluorescence

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La microscopie à fluorescence appliquée à la biologie a pour objectif d'obtenir des informations sur la structure 3D de l'échantillon observé. La précision obtenue est directement liée à la profondeur de champs de l'objectif. En choisissant une profondeur de champs inférieure à l'épaisseur de l'échantillon, plusieurs prises de vue à des focalisations différentes permettent d'extraire une information de volume. La limitation de cette technique en microscopie "classique" est que les éléments hors du champs de focalisation diffusent une quantité de lumière non négligeable.
L'Apotome, en réalisant des coupes optiques, permet de s'affranchir de cette lumière diffuse. Le principe consiste à focaliser un réseau (grille) et le déplacer sur l'échantillon. De ce fait l'intensité de lumière dans le champs de focalisation est affectée par le déplacement de cette grille et connaît des variations plus ou moins significatives qui sont proportionnelles à l'éloignement de cette lumière au plan de focalisation. Au contraire l'intensité de la lumière diffuse reste inchangée. La prise de trois images dans le même plan de focalisation avec trois positions de grilles différentes permet au système de distinguer la lumière informative (dont l'intensité varie) de la lumière diffuse.
En conclusion l'Apotome est capable de réaliser des coupes optiques d'1 µm d'épaisseur proches de la microscopie confocale."

Article proposé par Carl Zeiss S.A.S


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